中文摘要
体内研究IL-2基因瘤苗抗肿瘤效应
及其安全性检测
摘 要
目的:本课题研究转导白细胞介素-2(IL-2)基因的人大肠癌细胞瘤苗的抗肿瘤效应及其安全性检测。
方法:结肠癌细胞株COLO205采用脂质体法稳定转染IL-2基因, 应用ELISA法检测瘤苗的IL-2的表达,筛选高表达IL-2基因的细胞克隆作为基因瘤苗。将已构造好的结肠癌裸鼠模型分为两组,采用瘤体内注射的方法,注射经60Gy60Co照射的瘤苗细胞(治疗组)和PBS缓冲液(对照组),密切观察肿瘤生长状况,五周后处死所有裸鼠,取出肿瘤,观察并称重,免疫组化法检测IL-2 基因的表达。把已制备好的大肠癌基因瘤苗用60Co进行照射,将照射瘤苗细胞继续培养,用苔盼蓝染色法测定细胞的存活率,将照射的瘤苗细胞和未照射组的瘤苗进行荷瘤试验。
结果: 获得基因瘤苗最高表达为COLO205-H5量为139.13 ng/1×107/24h。瘤体内注射瘤苗组的裸鼠肿瘤生长缓慢,较早达到平台期,而对照组的肿瘤生长迅速,差异有显著性。( t=2.7,p<0.05)治疗组肿块的重量也明显小于对照组(t=7.2,p<0.01)。移植瘤治疗组IL-2免疫组化结果显示阳性,而对照组为阴性,说明了瘤苗在移植瘤体内存活并分泌IL-2。照射60Gy60Co瘤苗细胞培养在25天内全部死亡,荷瘤试验显示照射后的瘤苗未能成瘤,而未经照射组均已成瘤。
结论:通过体内实验研究证实了IL-2基因转导结肠癌细胞制备的瘤苗具有一定的抗肿瘤效应,经60Gy60Co照射后能消除其致瘤性,为肿瘤的治疗提供了一定的实验基础。
关键词:大肠癌,白细胞介素-2,基因瘤苗,移植瘤
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