摘 要

目的：

系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus，SLE）是一种自身免疫病，主要以自身抗体的形成，导致免疫复合物沉积，最终导致终末器官的损害为特征。系统性红斑狼疮可以累积全身各个器官，包括神经系统、消化系统、呼吸系统、血液系统、皮肤黏膜、骨骼肌肉、肝脏、肾脏等，其中以肾脏为主。SLE的致病原因非常复杂，包括基因和环境因素。由于SLE发病机制复杂，目前尚无有效方法根治SLE。在SLE中免疫系统紊乱，涉及天然免疫和适应性免疫。白介素-6（Interleukin-6，IL-6）是一种促炎性细胞因子，在炎症反应中发挥重要作用。已有研究报道在多种自身免疫疾病中，血清中的IL-6水平升高。本研究构建小鼠SLE模型，研究IL-6在SLE发病机制中的作用。

方法：

• 用ConA刺激C57小鼠脾脏淋巴细胞，提取淋巴细胞活化的DNA （activated lymphocyte derived DNA ,ALD-DNA）。用ALA-DNA免疫C57小鼠，检测SLE发病相关标志：血清中dsDNA抗体的含量、尿蛋白的含量、肾脏病理切片。
• 按照上述方法免疫IL-6敲除小鼠，检测SLE发病相关标志。
• 在体内，ELISA检测免疫小鼠血清中抗dsDNA抗体、IL-6、IL-17和TNF-a的含量。在体外，用ALD-DNA刺激C57小鼠脾脏细胞，ELISA检测上清中dsDNA抗体、IL-6、IL-17和 TNF-a的含量。
• 取免疫小鼠脾脏和淋巴结细胞，流式细胞分析Foxp3+细胞含量和CD4+T细胞活化状况。取免疫小鼠的脾脏细胞，做Treg和Th1的分化培养，流式细胞分析Foxp3+细胞含量。
• 取小鼠骨髓细胞做骨髓来源的树突状细胞（bone-marrow-derived dendritic cells, BMDC）的分化培养，用ALD-DNA刺激BMDC细胞，检测上清中IL-6、TNF-a的含量。取C57小鼠脾脏细胞，用上清做Treg的分化培养，流式细胞分析Treg的含量。用IL-6、TNF-a抗体分别阻断，流式细胞分析Treg含量。

 

结果：

• ALD-DNA免疫C57小鼠可以构建SLE模型，表现为血清中dsDNA抗体的含量升高、尿蛋白的含量升高、肾脏病理切片损伤。
• ALD-DNA免疫的IL-6敲除小鼠不发病。
• 在体内，ALD-DNA免疫的C57小鼠可以产生大量的dsDNA抗体、IL-6；在体外，ALD-DNA也可以刺激小鼠脾脏细胞产生大量dsDNA抗体、IL-6、IL-17和TNF-a。
• ALD-DNA免疫的C57小鼠相对于IL-6敲除小鼠和对照小鼠，Treg细胞含量较低，而CD4+T细胞活化程度增高。
• ALD-DNA可以刺激BMDC产生大量IL-6、TNF-a，上清共培养可以抑制Treg的分化。阻断IL-6后Treg的含量升高，而阻断TNF-a后Treg含量无明显变化。

结论：

在ALD-DNA免疫小鼠构建的SLE模型中，BMDC可产生IL-6，且IL-6可以抑制Treg的分化，从而促进疾病的发展。IL-6的研究不仅加深了我们对SLE致病机制的理解，并且提供了SLE的检测和治疗位点。

 

关键词：SLE、 IL-6、Treg、BMDC

 

AI创作