摘要
天花粉蛋白(Trichosanthin, TCS)是从中药植物栝楼块根中提取的一种 I 型核糖体失活蛋白,具有抗 HIV 感染、抗肿瘤等多种生物学活性。天花粉蛋白对黑色素瘤细胞、绒毛膜癌细胞等具有一定毒性,但由于缺乏对成纤维细胞、肝癌细胞等多种肿瘤细胞的敏感性,限制了在抗肿瘤方面的应用。细胞穿膜肽(Cell penetrating peptides, CPPs)是一类富含碱性氨基酸的短肽,具有介导蛋白质等生物活性分子高效进入细胞的能力。本课题以一种人源性穿膜肽 本研究就一种人源性穿膜肽 HBP 与重组天花粉蛋白融合表达,以此介导 TCS 高效进入肿瘤细胞内发挥其药理效应等进行探索。
本课题对这种天花粉来源的新型抗肿瘤药物的融合表达及药理性质进行研究。首先将 TCS 与 HBP 在原核表达系统中融合表达,经镍柱亲和层析进行样品纯化,纯化的样品怎么做,达到什么目的,需叙述清楚!经 MTT、激光共聚焦显微镜观察、流式细胞术等实验方法进行分析,。结果表明,融合蛋白 TCS-HBP 相对于 TCS 而言具有更为显著的体外抑制肿瘤细胞生长能力是否有具体数据?,都有哪些细胞?且具有更广的细胞谱。Western Blot 实验结果推测 TCS-HBP 可能通过线粒体途径诱导 Hela 细胞凋亡为何就得出此结论!!。 本课题以穿膜肽与抗肿瘤蛋白药物融合表达的穿膜策略为导向,选择人源性穿膜肽与抗肿瘤药物天花粉蛋白融合表达,通过对其穿膜效果的考察及体外诱导细胞凋亡能力、凋亡途径的研究,为抗肿瘤药物 TCS 运输及活性提高提供了一种新的策略。
关键词:天花粉蛋白,穿膜肽,凋亡,药物运输
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